Применение хромогенного метода для анализа бактериальных эндотоксинов

Хромогенный метод входит в число трех методов, которые также включают метод гель-сгустка и турбидиметрический метод для обнаружения или количественного определения эндотоксинов грамотрицательных бактерий с использованием лизата амебоцитов, экстрагированного из голубой крови мечехвоста (Limulus polyphemus или Tachypleus tridentatus).Его можно классифицировать как хромогенный анализ по конечной точке или кинетически-хромогенный анализ на основе конкретного используемого принципа анализа.

Принцип реакции таков: лизат амебоцитов содержит каскад ферментов сериновых протеаз (проферментов), которые могут активироваться бактериальными эндотоксинами.Эндотоксины активируют проферменты с образованием активированных ферментов (называемых коагулазой), последний катализирует расщепление бесцветного субстрата, высвобождая продукт пНА желтого цвета.Высвободившуюся пНК можно измерить фотометрически при длине волны 405 нм.Поскольку поглощение положительно коррелирует с концентрацией эндотоксина, тогда концентрацию эндотоксина можно определить количественно соответствующим образом.


Время публикации: 29 сентября 2019 г.